薄层层析常用显色剂配制及显色方法介绍

碘:  
适用于不饱和或者芳香族化合物  
配制方法:在100ml广口瓶中,放入一张滤纸,少许碘粒。 或者在瓶中,加入10g碘粒,30g硅胶  
高锰酸钾 
适用于含还原性基团化合物,比如羟基,氨基,醛  
配制方法 :1.5g KMnO4 + 10g K2CO3 + 1.25mL 10% NaOH + 200mL 水. 使用期3个月  
磷钼酸(PMA) 广谱  
配制方法 :10 g of 磷钼酸+100 mL 乙醇  
紫外灯  
适用于含共轭基团的化合物,芳香化合物  
硫酸铈 生物碱  
配制方法:10%硫酸铈(IV)+15%硫酸的水溶液  
氯化铁  
苯酚类化合物  
配制方法:1% FeCl3 + 50% 乙醇水溶液.  
桑色素(羟基黄酮)  广谱, 有荧光活性  
配制方法:0.1% 桑色素+甲醇  
茚三酮  
适用于氨基酸
配制方法:1.5g 茚三酮 + 100mL of 正丁醇+ 3.0mL 醋酸  
二硝基苯肼(DNP)  适用于醛和酮  
配制方法:12g二硝基苯肼+ 60mL 浓硫酸 + 80mL 水 + 200mL 乙醇  
香草醛(香兰素)  广谱  
配制方法:15g 香草醛 + 250mL 乙醇 +2.5mL 浓硫酸  
溴甲酚绿 
适用于羧酸,pKa<=5.0  
配制方法 :在100ml乙醇中,加入0.04g溴甲酚绿,缓慢滴加0.1M的NaOH水溶液,刚好出现蓝色即**。  
钼酸铈 广谱 
配制方法:235 mL 水 + 12 g 钼酸氨 + 0.5 g 钼酸铈氨 + 15 mL 浓硫酸  
茴香醛(对甲氧基苯甲醛)1  广谱  
配制方法:135 乙醇 + 5 mL 浓硫酸 + 1.5 mL of 冰醋酸 + 3.7 mL 茴香醛,剧烈搅拌,使混合均匀.  
茴香醛(对甲氧基苯甲醛)2  
适用于萜烯,桉树脑(cineoles), withanolides, 出油柑碱(acronycine)  配制方法:茴香醛:HClO4:丙酮:水 (1:10:20:80)
胺类物质常用的是: 
(1)磷钼酸显色剂:磷钼酸 5%-10% 乙醇溶液,淡黄色,久置变为浅绿色,不影响使用。浸板或喷板,加热,浅黄色背景,还原性物质显蓝绿色斑点,如果斑点太浓,可能显深黄色。 
(2)CAM显色剂:钼酸铵9.6g,硫酸铈0.4g,10%硫酸水溶液 200ml,混匀,极淡的黄色溶液,棕色瓶密闭保存,喷板,加热,白色背景,还原性物质显深蓝色斑点。   
显色的方法各种各样,主要根据化合物的性质选择不同的显色方法。许多关于植物有效成分提取与分离的书上都有介绍,通用的有碘、硫酸乙醇、香草醛-硫酸等,当然还有许多专用的显色剂,如:溴甲酚绿使有机酸显黄色,三氯化铁使酚羟基显蓝色,碘化铋钾使生物碱显桔黄色..... 显色剂化合物 
苯胺邻苯二甲酸酯 碳水化合物,糖类 溴甲酚绿羧酸 
二甲氨基苯甲醛 氨基酸,多肽 磷钼酸苯酚类 若丹明 类酯类 
薄层层析常用显色剂配制及显色方法 
附录 
附录1 薄层层析及纸层析常用显色剂配制及显色方法 通用试剂 
(1) 重络酸钾-硫酸:检查一般有机物. 
喷洒剂:5克重络酸钾溶于100毫升40%硫酸中. 薄层检查:喷洒后加热到150℃**班点出现 (2) 荧光素-溴:检查不饱和化合物喷洒剂:0.1克荧光素溶于100毫升乙醇中 溴试剂:5%的溴的四氯化碳溶液 
喷洒后处理:喷洒荧光素溶液后,放置存有溴溶液的缸内,可于紫外线分析灯下检查荧光,荧光素与溴化和成曙红(Eosin)(无萤光),而不饱和化合物则成溴加成物,保留了原有荧光;若点样较多,则呈黄色斑点,底板呈红色. (3) 碘:检查一般有机物. 
  方法:a 层析谱放密闭缸内或瓷盘内,缸内预先放有碘结晶少许,大部分有机化合物呈棕色斑点。 
B 层析谱放碘蒸气中5分钟(或喷5%碘的氯仿溶液)取出置空气中待过量的碘蒸气全部挥发后,喷1%淀粉的水溶液,斑点转成蓝色。 (4)硫酸:通用 
喷洒剂:5%的浓硫酸乙醇溶液,或15%浓硫酸正丁醇溶液,或浓硫酸-醋酸(1:1) 喷洒后处理:空气中干燥15分钟,再热**110℃直**出现颜色或荧光。 (5)硝酸银-氢氧化铵(Tollen-Zaffaroni)试剂:检查还原性物质。 溶液I : 0.1%N硝酸银; 溶液II: 5N氢氧化铵 喷洒剂: I和II以1:5混合(临用前混合) 
喷洒后处理: 105℃加热5~10分钟,**深黑色斑点出现. 
 (6)磷钼酸或磷钨酸,硅钨酸:检查还原性物质,类脂体,生物碱,甾体 喷洒剂: 5~10%磷钼酸或磷钨酸或硅钨酸乙醇溶液 喷洒后处理: 120℃加热**斑点出现. 
沉淀试剂: 1克硅钨酸溶于20毫升水中,加10%盐酸**强碱性.   生物碱 
  (7)硫酸??=硫酸:检查生物碱及含碘化合物 
  喷洒剂: 0.1克硫酸?混悬于4毫升水中,加入1克三氯醋酸,加热**沸,逐滴加入浓硫酸**澄清.   喷洒后处理: 110℃加热数分钟**斑点出现. 
  (8)碘化铋钾(Dragendorff)试剂:检查生物碱及其他含氟化合物. 溶液I: 0.85克次硝酸铋溶于10毫升冰醋酸40毫升水中 溶剂II: 8克碘化钾溶于20毫升水中. 
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