苏丹红等油溶性非食用色素的快速纸层析测定法
方法编号：CDC-2041
1 适用范围：本方法适用于苏丹红（1、2、3、4号）等油溶性非食用色素的现场快速检测。
2 方法原理：根据苏丹红等油溶性非食用色素的化学极性不同，通过展开剂在试纸上的展开距离不同来确定确定组分的存在。
3 检测试材（试剂盒组成）：快速层析纸，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ号系列苏丹红对照液，展开剂，毛细管。
4 样品处理：取约1g样品于容器中，加入2～4 mL乙酸乙酯，充分混匀，提取1min，静置3min以上。
5 点样：取一张层析纸，在端底向上约1cm处、平行相隔约1cm、用铅笔画出将要点样的+字线或五个小点。取1支毛细管沾取样品溶液的上层液，将其分别点在五个+字线上（样品溶液颜色较浅时，可在每次点样斑点挥干后重复点样），斑点直径控制在5毫米以内。另取四支毛细管分别沾取苏丹红1、2、3、4号对照液少许分别点在样品的原点上。
6 展开：取一个250mL以上的烧杯，加入约5mL展开剂，将层析纸（样品端朝下）插入展开剂中靠在杯壁上，待展开剂延层析纸向上平行展开**层析纸顶端约1厘米处时取出层析纸，观察结果。
7 结果判断
7.1在本实验条件下，如果样品在展开轨迹中出现斑点，其斑点展开（向上跑）的距离与某一对照液展开后的斑点距离相等、颜色相同或颜色虽浅却相近时，即可判断样品中含有这一色素。
7.2我*允许使用的色素除天然色素外没有油溶性色素，天然色素的化学极性往往很小，样品中即使含有天然色素，展开后的色斑会在前沿之处出现淡色斑点或淡色条带。
7.3如果对照物已经展开，而样品色斑在原处未动或展开的距离很小，表明这一色素为水溶性色素，可用水溶性色素检测试剂来判断其是食用的还是非食用的。
8 注意事项：
8.1本方法检出限为点样量10 µL,0.08µg 目视可见；**低检出浓度8µg/mL。精确定量需要采用高效液相色谱仪。
8.2 检测的样品数量较多时，不必每张层析纸上都点对照液，可一次点几个样品，当展开过程中出现斑点后，再做加入对照液实验。
8.3 苏丹红对照液的点样量不要太多，以能够展现斑点而无拖尾现象为宜。
8.4 展开剂的使用应适量，液面高度应控制在斑点以下，展开过程中层析纸不能倾倒，每展一张层析纸**好更换一次展开剂。
8.5 样品展开时，烧杯上不要盖盖，以便于斑点的展开。当环境温度较低，斑点展开的距离较短；或环境温度较高，展开剂展开到层析纸一半距离不再往上展时，应重新操作并在烧杯上加盖物品。
8.6 如果对照物展开后全部堆积到展开前沿处或原点处为移动，说明试剂或操作有问题，应查明原因重新操作。
9 试剂质量控制：将苏丹红系列对照液在试纸上按产品说明展开，应明显区分出不同的展开距离，否则试剂不可再用。
10 产品储藏与效期：试剂闭光常温保存，有效期为1年。
