作者在制作聚丙酞胺梯度凝胶 电泳时 ,
曾使用有关厂家生产的有机玻璃材质的
梯度混合仪 , 多次使用后 发现许多不便之处 , 便自
行设计制作了简易的梯度形成仪。 制作简单 ,
并收到了良好的使用效果。 现 以灌制总混合体积
6一 12 m l 的聚丙烯酞胺凝胶溶液为例 , 介绍如下 。
1 梯度仪的制作 见图
1 。 取 52 lm 平底
刻度玻璃试管
2 支 , 分别自底部向上约 07
m m 处截断。 然后取一个作稀溶液管 , 在其底
部熔开一孔 , 接上一个长约 51 m m , 内径1· 5
m
m 的玻璃管
( 玻璃加工
) , 使玻璃管内径底
缘线与试管底面平齐
; 取另一试管作浓 溶液
管 , 在其底部对称两侧按上述方法分别接上
一 个长约 51 m m , 内径 1 . 5 m m 的玻璃管 ( 玻
· 4 2 4 ·
璃加工 ) 。 将两个制作好的管子固定在铁架台
上 , 按图示方法 以相应尺寸的硅胶管进行连
接
。
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图 1 梯度混合装置示意图
1 一 硅
胶管 ; 2 ~ 蠕
动泵 ; 3 ~ 垂
直电泳夹 心板 ; 4 一 浓
溶液
管; 5 二 稀
溶液
管 ; 6 一 血
管夹
夹紧处 ; 7 一磁力搅拌器
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2 使用方法 使用前用血管夹夹住管 间
通道 , 向稀溶液管内加入稀溶液 , 稍许松开血管夹 , 使稀溶液充满整 个管间通道并有极少量流入浓溶液管 , 然后向浓溶液管加入浓溶液 , 待试剂加全 以后 , 开 启
蠕动泵 并移开血管
夹 , 控制一定的流速 , 即可形成均匀的梯度凝
胶溶液。
3 体会 ① 采用血管夹 控制管间通道非
常方便 , 而市售梯度仪常采用的旋塞 阀
, 在某些情况下如加浓溶液之前将稀溶液充满管间通道 , 操作起来就比较困难。 ② 一般梯度仪管间通道的清洗很困难 , 而这种设计正 好解决
了这一难题 。 ③玻璃材质方便了洗涤 , 洁净的
玻璃表面不会存在 贴壁液滴 , 梯度仪用完后
用纯水润洗数次即可进入下一轮使用可减少
洗涤 次数。 ④ 厂家的产品规格毕竟有限
, 对于特定的混合体积 , 梯度仪容量太大或太小, 都
将影 响梯度产生的效果。 作者原使用管内径
约为 3 0 m m 的梯度仪 , 对于 6 一 1 2 m l 的混
合体积 , 很难形成均一的梯度 , 改用自制梯度仪后
, 电泳结果和操作稳定性都有明显提高。再者
, 梯度仪并非实验室常备器械
, 需用 时可就地取材制作。
(1 9 94 一 1 2一 。 6 收稿
责任编辑侯衡广 )
